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Western blot

Western Blot(蛋白质印迹法)

简介:

      蛋白质印迹法(免疫印迹试验)即Western Blot是分子生物学、生物化学和免疫遗传学中常用的一种实验方法,是一种能对蛋白进行定性和半定量分析的方法。其基本原理是通过特异性抗体对凝胶电泳分离的细胞或生物组织样品中的蛋白条带进行着色,通过分析着色的位置和着色深度获得特定蛋白质在所分析的细胞或组织中的表达情况。

      该技术与Southern或Northern杂交方法类似,但采用的是SDS-PAGE凝胶电泳,被检测物是蛋白质,“探针”是抗体,“显色”用标记的二抗。经过PAGE分离的蛋白质样品,转移到固相载体(例如硝酸纤维素薄膜)上,固相载体以非共价键形式吸附蛋白质,且能保持电泳分离的多肽类型及其生物学活性不变。以固相载体上的蛋白质或多肽作为抗原,与对应的抗体起免疫反应,再与酶或同位素标记的第二抗体起反应,经过底物显色或放射自显影 以检测电泳分离的特异性目的基因表达的蛋白成分。

具体实验流程如下:

应用

      1)定性检测:目的蛋白有无、分子量大小、蛋白修饰

      2)半定量检测:目的蛋白表达差异

服务内容:

客户提供:

      1)样本分组、编号及背景资料,是否有其他要求说明

      2)抗体信息(厂商、货号等);如无抗体可经双方协商后由公司代购

公司提供:

      1)原始数据

      2)详尽实验报告及结果分析

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