干细胞科研服务

枢密提供高质量的病毒工具，睿健提供成熟的干细胞技术平台，双方协作为客户提供优质的科研服务。服务项目包括：

• 成体细胞重编程构建iPS细胞系；

利用无血清，无滋养层，无基因插入的重编程技术构建临床级别iPS细胞系；

• iPS细胞鉴定；

鉴定方法主要有：细胞形态观察，免疫荧光检测生物学标志，碱性磷酸酶活性检测，核型分析，畸胎瘤实验。

• iPS细胞定向诱导分化

将正常人来源或患者来源的成体细胞重编程为iPS细胞，再将iPS细胞定向诱导分化为特定的细胞（服务以神经干细胞、神经元、心肌细胞为主），作为后续研究的模型。

• 干细胞基因编辑

利用Crispr/cas9系统对干细胞进行基因编辑，包括基因定点插入、定点敲除、点突变。基因编辑可以应用于干细胞功能机制研究、疾病模型构建等方向。

• 细胞系构建

示踪：利用病毒工具在干细胞中稳定表达报告基因（如荧光蛋白、荧光素酶等），通过报告基因追踪干细胞的去向。

基因修饰：利用病毒工具对干细胞基因表达进行修改（过表达/敲低/敲入/敲除/点突变），便于研究基因的功能。

• 疾病细胞模型构建

已知疾病发生机制：假如已知该疾病主要由某个基因的点突变引起，利用基因编辑在细胞中再现这个突变。

未知疾病发生机制：从患者身上获取细胞进行重编程构建iPS细胞，再进行诱导分化，获得基因缺陷的功能细胞。

• 新药研发

新药筛选：疾病模型细胞上进行小分子药物筛选，获得有利于疾病治疗的候选药物

药物毒性测试：

药物作用验证：

• 神经元活动记录

神经递质探针：

在G蛋白偶联受体的某个区域插入荧光蛋白，神经递质与受体结合，将导致荧光信号发生变化，从而监测神经元神经递质的浓度。枢密可提供各种神经递质对应的探针病毒产品。（乙酰胆碱、多巴胺、去甲肾上腺素、）

钙离子探针：

利用病毒工具将遗传编码指示剂Gcamp（含有GFP）导入神经元，当Ca2+结合钙调蛋白时，GFP荧光信号增强，从而监测细胞钙离子浓度。

电压探针：

利用病毒向神经元导入基因编码荧光指示蛋白，它能随着神经细胞的电压变化而发出荧光，因此研究人员就能实时观测到细胞中的电活性。

光遗传技术：

利用病毒工具向神经元导入光敏感蛋白或或光抑制蛋白，利用光来激活或者抑制神经元的活性。

化学遗传技术：

通过将不同的G蛋白偶联受体进行改造成为DREADDS (Designer Receptor Exclusively Activated by Designer Drugs)后，其只接受外源性的配体的信号，并激活相应的GPCR信号通路，从而引发细胞不同的兴奋性变化。因此，应用于神经细胞内，则会进一步引起钠离子通道、钙离子通道的打开或关闭，从而诱发神经细胞膜电位的变化

• 干细胞功能研究

细胞功能常规实验：细胞增殖，细胞凋亡等常规检测

干细胞增殖与分化基因调控机制研究

干细胞干性检测：生物学标志，成球试验，成瘤实验

干细胞诱导分化：2D分化，3D分化